
Cy3 TUNEL 細(xì)胞凋亡試劑盒
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細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí), 會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA,產(chǎn)生180 bp-200 bp的 DNA 片段,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)的特異的梯狀Ladder圖譜。基因組DNA雙鏈或單鏈斷裂時(shí)會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化作用下,與SF/Cy-dUTP結(jié)合,從而通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀直接進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(Terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA的斷裂,因而沒(méi)有3'-OH形成,很少能夠被染色。Tunel法可以對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中廣泛采用。本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。可選擇性的檢測(cè)凋亡細(xì)胞,而非壞死細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細(xì)胞。本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡,耗時(shí)短,只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
1.使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2.染色背景較重或非特異性著色明顯時(shí)可適當(dāng)減少染色時(shí)間。
3.實(shí)驗(yàn)時(shí)建議增加陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照組。
4.組分A使用時(shí)請(qǐng)佩戴口罩、手套,如接觸皮膚,請(qǐng)立即用大量水沖洗。
5.熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
6.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。